Piala Negara-Negara Afrika 1965 adalah edisi kelima dari turnamen sepak bolaPiala Negara-Negara Afrika. Turnamen ini diselenggarakan di Tunisia mulai tanggal 12-21 November 1965. Terdapat 6 tim yang berpartisipasi pada putaran final.
Ghana kembali menjuarai turnamen ini setelah mengalahkan tuan rumah Tunisia dengan skor 3–2 setelah perpanjangan waktu pada pertandingan final di Stadion Chedly Zouiten, Tunis. Di sisi lain Pantai Gading berada pada peringkat ketiga setelah mengalahkan Senegal dalam pertandingan perebutan tempat ketiga di stadion yang sama. Pemain GhanaOsei Kofi menjadi pemain terbaik sepanjang turnamen. Tiga orang pemain menjadi pencetak gol terbanyak sepanjang putaran final dengan 3 gol.